Analyse et contrôle
HPLC
Aussi écrit : chromatographie liquide haute performance, CLHP, RP-HPLC
Une méthode de séparation qui permet de mesurer la pureté d'un échantillon.
La chromatographie liquide haute performance fait passer un échantillon dissous à travers une colonne remplie d'un matériau adsorbant, sous forte pression. Les composants du mélange traversent la colonne à des vitesses différentes selon leur affinité pour ce matériau, et sortent donc séparés dans le temps.
Un détecteur enregistre ce qui sort, produisant un chromatogramme : une courbe où chaque pic correspond à un composant, et où l'aire du pic est proportionnelle à sa quantité. La pureté d'un échantillon s'exprime alors comme le pourcentage que représente le pic principal par rapport à la somme de tous les pics.
En version phase inverse — RP-HPLC —, la colonne est apolaire et la séparation se fait selon l'hydrophobie des molécules. C'est la configuration la plus employée pour les peptides.
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